根癌农杆菌介导的雪莲冷诱导蛋白基因对薰衣草遗传转化的初步研究

邢文超1,2 贠强1,*赵民安1 曹旭1
1 中国科学院新疆理化技术研究所,乌鲁木齐 830011;2 中国科学院研究生院,北京100039

通信作者:贠强;E-mail: yunq@ms.xjb.ac.cn;Tel: 0991-3838277

摘 要:

预培养 6 d 的薰衣草下胚轴在添加 100 µmol•L-1 乙酰丁香酮(AS)的根癌农杆菌重悬液中浸染 10 min 后共培养 2~3 d, 再经过 7~10 d 的恢复培养之后用包含 10 mg•L-1 潮霉素 B 和 200 mg•L-1 头孢霉素的筛选培养基进行筛选是较为理想的遗传 转化条件。通过 GFP 观察和 GUS 染色以及对筛选得到的抗性芽的 PCR 检测证明,外源目的基因(雪莲冷诱导蛋白基因 scp) 已整合到薰衣草基因组中,阳性率为 40%。

关键词:薰衣草;根癌农杆菌介导;遗传转化;下胚轴

收稿:2006-02-24   修定:2006-08-29

资助:中国科学院西部行动高新技术项目(KGCX2-SW-506)和 中科院百人计划项目(2002)。

根癌农杆菌介导的雪莲冷诱导蛋白基因对薰衣草遗传转化的初步研究

邢文超1,2 贠强1,*赵民安1 曹旭1
1 中国科学院新疆理化技术研究所,乌鲁木齐 830011;2 中国科学院研究生院,北京100039

Corresponding author: ; E-mail: yunq@ms.xjb.ac.cn; Tel: 0991-3838277

Abstract:

预培养 6 d 的薰衣草下胚轴在添加 100 µmol•L-1 乙酰丁香酮(AS)的根癌农杆菌重悬液中浸染 10 min 后共培养 2~3 d, 再经过 7~10 d 的恢复培养之后用包含 10 mg•L-1 潮霉素 B 和 200 mg•L-1 头孢霉素的筛选培养基进行筛选是较为理想的遗传 转化条件。通过 GFP 观察和 GUS 染色以及对筛选得到的抗性芽的 PCR 检测证明,外源目的基因(雪莲冷诱导蛋白基因 scp) 已整合到薰衣草基因组中,阳性率为 40%。

Key words: 薰衣草;根癌农杆菌介导;遗传转化;下胚轴

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