《植物生理学报》 2007, 43(1): 41-48

西伯利亚蓼甘油醛-3- 磷酸脱氢酶基因的cDNA 克隆与序列分析

李晓泽，刘关君，杨传平*

东北林业大学林木遗传育种省级重点实验室，教育部林木遗传育种与生物技术重点实验室，哈尔滨150040

通信作者：杨传平；E-mail: yangcp@nefu.edu.cn；Tel: 0451-82190006

摘　要：

根据 NaHCO3 胁迫下西伯利亚蓼茎部消减库中甘油醛 -3- 磷酸脱氢酶基因(GAPDH)表达序列标签序列设计引物，采 用 cDNA 末端快速扩增技术，从西伯利亚蓼茎中扩增出 GAPDH 的全长 cDNA 序列。该 cDNA 序列全长 1 331 bp，完整阅 读框 1 014 bp，编码 337 个氨基酸。属于稳定蛋白，具有 GAPDH 保守功能域。氨基酸组成与其他已知高等植物来自细胞 质中的 GAPDH 基因 cDNA 序列具有很高的同源性，最高可以达到 96%。通过转酿酒酵母 INVSC1 的 NaHCO3 和 NaCl 胁迫 试验表明，转基因 INVSC1 (pYES2-GAPDH)有明显的抗盐胁迫特性。在 10% NaHCO3 和 4 mol•L-1 NaCl 胁迫下，转基因 INVSC1 (pYES2-GAPDH)菌株存活率明显比 INVSC1 (pYES2)高，可以推测 GAPDH 基因赋予 INVSC1 (pYES2-GAPDH)抗 NaHCO3 和 NaCl 的能力。该基因的 cDNA 序列在 GenBank 中登录号为 DQ922680。

关键词：西伯利亚蓼；甘油醛-3- 磷酸脱氢酶基因；基因克隆；序列分析

收稿：2006-09-11   修定：2007-01-17

资助：国家重大基础研究发展规划“973”项目(G1999016003) 和黑龙江省重点攻关项目(GB06B303)。

西伯利亚蓼甘油醛-3- 磷酸脱氢酶基因的cDNA 克隆与序列分析

李晓泽，刘关君，杨传平*

东北林业大学林木遗传育种省级重点实验室，教育部林木遗传育种与生物技术重点实验室，哈尔滨150040

Corresponding author: ; E-mail: yangcp@nefu.edu.cn; Tel: 0451-82190006

Abstract:

根据 NaHCO3 胁迫下西伯利亚蓼茎部消减库中甘油醛 -3- 磷酸脱氢酶基因(GAPDH)表达序列标签序列设计引物，采 用 cDNA 末端快速扩增技术，从西伯利亚蓼茎中扩增出 GAPDH 的全长 cDNA 序列。该 cDNA 序列全长 1 331 bp，完整阅 读框 1 014 bp，编码 337 个氨基酸。属于稳定蛋白，具有 GAPDH 保守功能域。氨基酸组成与其他已知高等植物来自细胞 质中的 GAPDH 基因 cDNA 序列具有很高的同源性，最高可以达到 96%。通过转酿酒酵母 INVSC1 的 NaHCO3 和 NaCl 胁迫 试验表明，转基因 INVSC1 (pYES2-GAPDH)有明显的抗盐胁迫特性。在 10% NaHCO3 和 4 mol•L-1 NaCl 胁迫下，转基因 INVSC1 (pYES2-GAPDH)菌株存活率明显比 INVSC1 (pYES2)高，可以推测 GAPDH 基因赋予 INVSC1 (pYES2-GAPDH)抗 NaHCO3 和 NaCl 的能力。该基因的 cDNA 序列在 GenBank 中登录号为 DQ922680。

Key words: 西伯利亚蓼；甘油醛-3- 磷酸脱氢酶基因；基因克隆；序列分析